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固定是組織處理過程中重要的環(huán)節(jié),也是在整個制片過程中無法補救的一步,如果因固定不及時或固定液量不足而導(dǎo)致組織細胞的自溶,這一過程是無法逆轉(zhuǎn)的,因此固定是決定了病理實驗(冰凍切片實驗除外)是否成功的關(guān)鍵因素。
抑制細菌繁殖所致的腐敗。
對組織具有硬化作用,有利于切片。柔軟組織(如腦)的質(zhì)地變硬易于操作。
組織離體后盡量能馬上固定,至少也要保證在30分鐘內(nèi)固定。
固定液濃度需準確,過稀或過濃都會影響組織的形態(tài)和固定效果。
室溫或37℃。溫度過高,加快組織的收縮和細胞自溶;溫度過低,延緩固定液滲透速度,需增加固定時長。
24h~72h,如果溫度太低或者組織過大,需要適當(dāng)延長固定時間。如果是做RNA原位雜交項目,固定時間不要超過72h。
不大于1cm*1cm*0.5cm。厚度2~3mm,不要超過5mm。