常見特異性抗體染色類型及樣本類型

不管mIHC（多色免疫熒光）、IHC-P（石蠟切片免疫組化）、IHC-Fr（冰凍切片免疫組化）、ICC（免疫細(xì)胞化學(xué)）、IF（免疫熒光）都是組織原位觀察各蛋白標(biāo)志物的表達(dá)水平，主要適用：石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片、涂片等有些抗體可通用。

其他：FC（細(xì)胞流式）、WB（蛋白質(zhì)印跡）、IP（免疫沉淀）、elisa（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）解離細(xì)胞或把組織勻漿檢測(cè)特異性蛋白的表達(dá)水平不一定適用于mIHC染色，需要具體測(cè)試。

mIHC染色及樣本類型：

mIHC染色方式為多輪依次染色，原理同IHC染色的兩步法，同適用于石蠟切片和冰凍切片，因染色步驟比較繁瑣，需要預(yù)實(shí)驗(yàn)方案構(gòu)建，冰凍切片容易脫片及形態(tài)欠佳。但對(duì)石蠟切片非常友好，不管是單個(gè)的組織蠟塊還是TMA組織芯片，對(duì)于回顧性樣本研究具有先天的優(yōu)勢(shì)，除特殊組織如骨頭石蠟切片使用粘附性好的玻片都可以實(shí)現(xiàn)在一張玻片上染3-8個(gè)靶標(biāo)蛋白。

mIHC一抗選擇：

一抗無(wú)需任何偶聯(lián)物（unconjugated）；一抗無(wú)需任何標(biāo)記，再連接通用HRP標(biāo)記的二抗就可以，連接熒光基團(tuán)顯色，使用合適的熒光通道成像即可。

樣本種屬：選擇明確適用物種相同的抗體。

實(shí)驗(yàn)類型：一般選抗體說(shuō)明書列有IHC-P或mIHC即可。

抗體宿主選擇：盡可能選擇與樣本不同物種的一抗，避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

推薦單克隆抗體：盡量選擇品牌廠家文獻(xiàn)及評(píng)論都比較多穩(wěn)定的單克隆抗體，染色結(jié)果背景干凈。

免疫球蛋白類型：一般都是IgG（各亞型皆可）類型的一抗，匹配IgG二抗。

適用于IHC-P的組化及熒光測(cè)試

mIHC染色展示